抗体药物，如单克隆抗体、双抗体、抗体片段、抗体偶联药物以及抗体融合蛋白等，因其强靶向性、高特异性及较低的毒副作用而在自身免疫疾病与肿瘤治疗领域取得了显著成就。面对不断增长的市场需求，开发新型抗体药物并优化下游生产工艺，具备重要的经济价值与社会影响。

抗体纯化过程复杂，需要结合多种分离手段来设计合理的纯化流程，以高效获得高质量的产品。抗体的下游工艺通常包括以下步骤：首先，进行细胞澄清收获，通过离心与过滤等方法去除细胞及其碎片；其次进行亲和捕获，通常采用Protein A亲和层析来捕获抗体；然后，经过低pH孵育以去除病毒；接着进行中间纯化与精纯，以去除产品及过程相关的杂质；最后，通过纳滤与超滤去除病毒并获得最终的抗体产品。这些步骤的目的是快速从复杂的发酵液中捕获目标抗体。

Protein A源于金黄色葡萄球菌，能够特异性结合IgG FC片段，通常能在一步纯化中达到90%以上的纯度，且能够有效捕获人源抗体（非IgG3）及FC融合蛋白，因此被认为是捕获抗体蛋白最有效的层析方式。低pH洗脱与低pH孵育衔接，能够有效减少病毒载量7-8 log，后续仅需1-2步纯化过程即可完成抗体纯化。在选择Protein A层析介质时，需考虑载量、流速、耐碱性、使用寿命以及Protein A残留量等因素，以确保安全的纯度。

接下来的步骤是进一步去除宿主蛋白、宿主DNA、聚集体、抗体片段、内毒素和脱落的Protein A等相关杂质。离子交换层析和疏水层析是此环节常用的分离手段。离子交换层析依据抗体与杂质之间的电荷差异来实现有效分离。阴离子交换层析一般采用流穿模式去除内毒素、病毒、HCD及HCP等杂质，而阳离子交换层析常选择结合洗脱模式，在酸性条件下，多数抗体与介质结合，通过增加洗脱缓冲液中的盐浓度或提高pH进行洗脱，效果显著。特别是兼具高分辨率与高选择性的阳离子交换介质如MegaPolyBXS、DiamondCD-S和DiamondSPMustang等，在去除聚集体、宿主蛋白和Protein A方面表现尤为突出。

疏水层析则通常与离子交换层析互为补充，大多数情况下抗体的疏水性强于大部分杂质，主要用于去除抗体聚集体和HCP。HIC介质的疏水性对收率和杂质去除效果有较大影响，因此选择合适的配基是疏水层析的关键。常见配基的疏水性强弱顺序为Butyl-S ＜ Butyl ＜ Octyl ＜ Phenyl。此外，诸如DiamondMMC与DiamondMIX-A等兼具疏水作用与离子交换作用的多模式填料正受到越来越多的关注，这类混合模式介质对于宿主蛋白、脱落的配基及多聚体等杂质的去除能力高效，能够有效简化纯化步骤，提高纯化效率。

随着抗体药物在临床治疗中的广泛应用，下游纯化工艺的开发显得愈发重要。灵活运用各种层析模式与合理选择层析填料，将为抗体纯化提供更加经济和高效的工艺路线。尊龙凯时成立于2008年，致力于为分离纯化提供高质量的层析介质，是中国较早具备大规模生产分离纯化介质能力的企业之一。尊龙凯时所提供的产品涵盖各类分离纯化介质、预装柱、实验室及工业生产级空柱、微载体，同时也提供分离纯化工艺开发服务及填料定制。